人naive CD4 T细胞分离试剂盒 #SN3104
• 操作简便
• 纯度最高可达95%
• 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非naïve CD4 T细胞,再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联,然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只 需倒入一个新的管中即可分离,分离后的细胞可立即用于后续应用,如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
现价:SN3104L 6720元; SN3104M 3733元;SN3104S 840元
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试剂盒组分
产品名称 |
存储条件 |
缓冲液成分 |
功能 |
EasyIsoTM Human naïve CD4 T Cell Isolation Cocktail |
4°C保存,避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
识别非naïve CD4 T细胞抗体混合液, 标记非目的细胞 |
EasyIsoTM Streptavidin Nanobeads |
4°C保存,避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
磁珠结合非naïve CD4 T细胞,通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline 运输条件: 4°C运输
设备和试剂要求
. 缓冲液:FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
. 耗材:70 μm无菌尼龙滤网;无菌离心管
. 仪器:离心机 ,磁力架
温馨提示
. 推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心分离PBMC,不建议采用红细胞裂解液
. 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作 ,能够提高细胞得率
. 确保FACS Buffer渗透压稳定,免疫细胞较为敏感
. 确保每一步无菌操作,谨防污染
操作步骤
步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
1 |
准备人PBMC细胞至指定浓度 |
1 x 10^8 cells/mL |
2 |
加入EasyIsoTM Human naïve CD4 T cell Isolation Cocktail 至样品中 |
100 μL/mL |
3 |
抗体和细胞孵育 |
常温孵育10 min |
4 |
震荡混匀 Streptavidin Nanobeads |
混匀30 s |
5 |
加Streptavidin Nanobeads至样品中 |
100 μL/mL |
6 |
轻柔混匀磁珠和细胞,孵育 |
常温孵育5 min |
7 |
加入FACS Buffer到样品中,轻轻混匀 |
总体积加入至2.5 mL ( 5 mL流式管) 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
8 |
样品置于磁力架上 ,使磁珠吸附 |
单孔磁力架吸附(3 min) 联排磁力架吸附(5 min) |
9 |
倾斜磁力架,将样品倒入新的收集管中,收集样品 |
细胞分离成功 |
数据展示
如图:采用英诺思EasyIso™细胞分选产品(#SN3104)分离PBMC中的naïve CD4 T 细胞。(A)分选前PBMC中 ,CD4 T细胞比例为31% ,其 中约有43%的CD45RA+CD45RO-的naïve CD4 T细胞。( B)分选后,CD4 T细胞比例高达97.1% ,其中CD45RA+CD45RO-的naïve CD4 T细胞纯度高达96.8%。