小鼠 NK 细胞分离试剂盒 #SN4201
. 操作简便
. 无需裂红
. 纯度最高可达95%
. 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非NK细胞，再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联，然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个 新的管中即可分离，分离后的细胞可立即用于后续应用，如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
现价：SN4201L 5600元； SN4201M 3360元； SN4201S 840元
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试剂盒组分
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产品名称 |
存储条件 |
缓冲液成分 |
功能 |
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EasyIso TM Mouse NK Cell Isolation Cocktail |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
识别非 NK细胞抗体混合液，标记非目的细胞 |
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EasyIso TM Streptavidin Nanobeads |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
磁珠结合非 NK细胞，通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline 运输条件： 4°C运输
设备和试剂要求
. 缓冲液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
. 耗材：70 μm无菌尼龙滤网；无菌离心管
. 仪器：离心机 ，磁力架
温馨提示
. 小鼠脾脏研磨后采用70 μm无菌尼龙滤网过滤即可用于分离 ，无需采用红细胞裂解液
. 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作 ，能够提高细胞得率
. 确保FACS Buffer渗透压稳定，免疫细胞较为敏感
. 确保每一步无菌操作，谨防污染
操作步骤
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步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
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1 |
准备脾脏单细胞悬液至指定浓度 |
1 x 10^8 cells/mL |
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2 |
加入EasyIso TM Mouse NK Cell Isolation Cocktail至样品中 |
100 μL/mL |
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3 |
抗体和细胞孵育 |
常温孵育10 min |
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4 |
震荡混匀 Streptavidin Nanobeads |
混匀30 s |
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5 |
加Streptavidin Nanobeads至样品中 |
100 μL/mL |
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6 |
轻柔混匀磁珠和细胞，孵育 |
常温孵育5 min |
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7 |
加入FACS Buffer到样品中，轻轻混匀 |
总体积加入至2.5 mL （ 5 mL流式管） 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
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8 |
样品置于磁力架上 ，使磁珠吸附 |
单孔磁力架吸附（3 min） 联排磁力架吸附（5 min） |
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9 |
倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品 |
细胞分离成功 |
数据
如图：小鼠脾脏 NK 细胞的分离。（A）分离C57BL/6背景小鼠的脾脏，磨碎后采用70 μm无菌尼龙滤网过滤后，进行CD45、CD3和CD49染 色 ，CD3-CD49b+的NK细胞比例约3%。（ B）采用（#SN4201）分离NK细胞，分选后的CD3-CD49b+的NK细胞纯度可达83.9%。
