EasyIso™ 小鼠DN T细胞分离试剂盒 #SN4105
操作简便
无需裂红
纯度最高可达99%
18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非DN CD3 T细胞，再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联，然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离，分离后的细胞可立即用于后续应用，如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
产品简介
本试剂盒采用阴选的方式，通过无柱磁极分离小鼠脾脏中的CD4-CD8- 双阴性（Double Negative, DN）的CD3 T细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触DN CD3 T细胞，能够最大限度保持T细胞最原始的状态。
- 操作简便
- 无需裂红
- 纯度最高可达99%
- 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非DN CD3 T细胞，再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联，然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离，分离后的细胞可立即用于后续应用，如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
试剂盒组分
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产品名称 |
存储条件 |
缓冲液成分 |
功能 |
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EasyIso TM Mouse DN CD3 T Cell Isolation Cocktail |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
识别非DN CD3 T细胞 |
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EasyIso TM Streptavidin Nanobeads |
4°C保存，避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
磁珠结合非DN CD3 T细胞，通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
运输条件： 4°C运输
设备和试剂要求
- 缓冲液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
- 耗材：70 μm无菌尼龙滤网；无菌离心管
- 仪器：离心机，磁力架
温馨提示
- 脾脏样本无需裂红处理
- 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作，能够提高细胞得率
- 确保FACS Buffer渗透压稳定，免疫细胞较为敏感
- 确保每一步无菌操作，谨防污染
操作步骤
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步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
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准备脾脏单细胞悬液至指定浓度 |
1 x 10^8 cells/mL |
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2 |
加入EasyIso TM Mouse DN CD3 T cell Isolation Cocktail至样品中 |
100 μL/mL |
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3 |
抗体和细胞孵育 |
常温孵育10 min |
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4 |
震荡混匀 Streptavidin Nanobeads |
混匀30 s |
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5 |
加Streptavidin Nanobeads至样品中 |
100 μL/mL |
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6 |
轻柔混匀磁珠和细胞，孵育 |
常温孵育5 min |
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加入FACS Buffer到样品中，轻轻混匀 |
总体积加入至2.5 mL （5 mL流式管） 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
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8 |
样品置于磁力架上，使磁珠吸附 |
单孔磁力架吸附（3 min） 联排磁力架吸附（5 min） |
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9 |
倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品 |
细胞分离成功 |
