EasyIso™ 人CD4 T细胞分离试剂盒 #SN3102
本试剂盒采用阴选的方式,通过无柱磁极分离人PBMC中的CD4 T细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触CD4 T细胞,能够最大限度保持T细胞最原始的状态。
• 操作简便
• 纯度最高可达99%
• 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非CD4 T细胞,再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联,然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离,分离后的细胞可立即用于后续应用,如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
• 操作简便
• 纯度最高可达99%
• 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非CD4 T细胞,再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联,然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离,分离后的细胞可立即用于后续应用,如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。
试剂盒组分
产品名称 |
存储条件 |
缓冲液成分 |
功能 |
EasyIso™ Human CD4 T cell Isolation Cocktail |
4°C保存,避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
识别非CD4 T细胞抗体混合液,标记非目的细胞 |
EasyIso™ Streptavidin Nanobeads |
4°C保存,避免冷冻 |
PBS, 0.1% BSA |
磁珠结合非CD4 T细胞,通过磁极去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
运输条件: 4°C运输
设备和试剂要求
- 缓冲液:FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
- 耗材:70 μm无菌尼龙滤网;无菌离心管
- 仪器:离心机,磁力架
温馨提示
- 推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心分离PBMC,不建议采用红细胞裂解液
- 采用FACS Buffer而不是PBS进行操作,能够提高细胞得率
- 确保FACS Buffer渗透压稳定,免疫细胞较为敏感
- 确保每一步无菌操作,谨防污染
操作步骤
步骤 |
说明 |
剂量和时间 |
1 |
准备PBMC单细胞悬液至指定浓度 |
1 x 10^8 cells/mL |
2 |
加入EasyIso™ Human CD4 T cell Isolation Cocktail至样品中 |
100 μL/mL |
3 |
抗体和细胞孵育 |
常温孵育10 min |
4 |
震荡混匀 Streptavidin Nanobeads |
混匀30 s |
5 |
加Streptavidin Nanobeads至样品中 |
100 μL/mL |
6 |
轻柔混匀磁珠和细胞,孵育 |
常温孵育5 min |
7 |
加入FACS Buffer到样品中,轻轻混匀 |
总体积加入至2.5 mL (5 mL流式管) 总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管) |
8 |
样品置于磁力架上,使磁珠吸附 |
单孔磁力架吸附(3 min) 联排磁力架吸附(5 min) |
9 |
倾斜磁力架,将样品倒入新的收集管中,收集样品 |
细胞分离成功 |
数据展示
如图:采用Immuno-X系列产品(#SN3102)分离PBMC中的CD4 T 细胞。(A)分选前健康人PBMC中CD4 T细胞比例约为21.6%。(B)分选后,CD3+CD4+ T细胞纯度高达95.6%。