EasyIso™ 人CD19 B细胞分离试剂盒 #SN3001

本试剂盒采用阴选的方式，通过无柱磁极分离人PBMC中的CD19 B细胞。分离过程中抗体和磁珠不会接触CD19 B细胞，能够最大限度保持B细胞最原始的状态。
• 操作简便
• 纯度最高可达99%
• 18-20分钟完成分离
试剂盒通过生物素偶联的抗体标记非CD19 B细胞，再将细胞和链霉亲和素纳米磁珠孵育偶联，然后通过磁极进行无柱分离。目标细胞只需倒入一个新的管中即可分离，分离后的细胞可立即用于后续应用，如流式细胞术、细胞培养和功能实验等。

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产品详情

试剂盒组分

产品名称	存储条件	缓冲液成分	功能
EasyIso™ Human FcR Blocker	4°C保存，避免冷冻	PBS, 0.1% BSA	封闭FcR受体，降低抗体非特异性结合
EasyIso™ Human CD19 B cell Isolation Cocktail	4°C保存，避免冷冻	PBS, 0.1% BSA	识别非CD19 B细胞抗体混合液，标记非目的细胞
EasyIso™ Streptavidin Nanobeads	4°C保存，避免冷冻	PBS, 0.1% BSA	磁珠结合非CD19 B细胞，通过磁极去除

BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline

运输条件： 4°C运输

设备和试剂要求

缓冲液：FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
耗材：70 μm无菌尼龙滤网；无菌离心管
仪器：离心机，磁力架

温馨提示

推荐采用淋巴细胞分离液进行密度梯度离心分离PBMC，不建议采用红细胞裂解液
采用FACS Buffer而不是PBS进行操作，能够提高细胞得率
确保FACS Buffer渗透压稳定，免疫细胞较为敏感
确保每一步无菌操作，谨防污染

操作步骤

步骤	说明	剂量和时间
1	准备PBMC单细胞悬液至指定浓度	1 x 10^8 cells/mL
2	加入EasyIso™ Human FcR Blocker至样品中	100 μL/mL
3	加入EasyIso™ Human CD19 B cell Isolation Cocktail至样品中	100 μL/mL
4	抗体和细胞孵育	常温孵育10 min
5	震荡混匀 Streptavidin Nanobeads	混匀30 s
6	加Streptavidin Nanobeads至样品中	100 μL/mL
7	轻柔混匀磁珠和细胞，孵育	常温孵育5 min
8	加入FACS Buffer到样品中，轻轻混匀	总体积加入至2.5 mL （5 mL流式管）总体积加入至 7.5 mL (15 mL离心管)
9	样品置于磁力架上，使磁珠吸附	单孔磁力架吸附（3 min）联排磁力架吸附（5 min）
10	倾斜磁力架，将样品倒入新的收集管中，收集样品	细胞分离成功